?。?）吸管：洗凈、烘干后的吸管，在吸口的一頭塞入少許脫脂棉花，以防在使用時(shí)造成污染。塞入的棉花量要適宜，多余的棉花可用酒精燈火焰燒掉。每支吸管用一條寬約4~5cm的紙條，以30~50℃的角度螺旋形卷起來(lái)，吸管的高等在頭部，另一端用剩余的紙條打成一結，以防散開(kāi)，標上容量，若干支吸管包扎成一束進(jìn)行滅菌。使用時(shí)，從吸管中間擰斷紙條，抽出試管。
　?。?）試管和三角瓶：試管和三角瓶都需要做合適的棉塞，棉塞可起過(guò)濾作用，避免空氣中的微生物進(jìn)入容器。制作棉塞時(shí)，要求棉花緊貼玻璃壁，沒(méi)有皺紋和縫隙，松緊適宜。過(guò)緊易擠破管口和不易塞入；過(guò)松易掉落和污染。棉塞的長(cháng)度不小于管口直徑的2倍，約2/3塞進(jìn)管口。
　　目前，國內已開(kāi)始采用塑料試管塞，可根據所用的試管的規格和試驗要求來(lái)選擇和采用合適的塑料試管塞。
　　若干支試管用繩扎在一起，在棉花部分外包裹油紙或牛皮紙，再用繩扎緊。三角瓶加棉塞后單個(gè)用油紙包扎。
　?。ㄋ模?、玻璃器材的滅菌
　　滅菌:干熱滅菌:160～165℃烘箱中滅菌2h；或濕熱滅菌:121℃20～30min
　　u干熱滅菌法
　　1、將包扎好的玻璃器皿擺入電熱烘箱中，相互間要留有一定的空隙，以便空氣流通。
　　2、關(guān)緊箱門(mén)，打開(kāi)排氣孔，接上電源。
　　3、待箱內空氣排出到一定程度時(shí)，關(guān)閉上排氣孔，加熱至滅菌溫度后，固定溫度進(jìn)行滅菌：160℃—165℃保持2小時(shí)。2小時(shí)后切斷電源。
　　4、待烘箱內溫度自然降溫冷卻到60℃以下后，再開(kāi)門(mén)取出玻璃器皿，避免由于溫度突然下降而引起玻璃器皿碎裂。
　　高壓蒸汽滅菌法
　　1、關(guān)好排水閥門(mén)，放入純凈水或蒸餾水至標度。注意水量一定要加足，否則容易造成事故。
　　2、將須要滅菌的器材、培養基等裝入滅菌鍋中，加蓋密封。旋緊螺旋時(shí)，先將每個(gè)螺旋旋轉到一定程度（不要太緊），然后再旋緊相對的兩個(gè)螺旋，以達到平衡旋緊，否則易造成漏氣，達不到完全滅菌的目的。
　　3、通電加溫，打開(kāi)排氣活門(mén)，排盡鍋內的空氣。通常當壓力表指針升至5磅或0.05MPa時(shí)，打開(kāi)排氣活門(mén)放氣，待壓力表指針降至零點(diǎn)一小段時(shí)間后，再關(guān)閉活門(mén)。即活門(mén)沖出的全部是蒸汽時(shí)則表示完全，此時(shí)可關(guān)閉排氣活門(mén)，如果過(guò)早關(guān)閉活門(mén)，排氣不完全，也達不到完全滅菌的目的。
　　4、恒溫滅菌:0.1MPa或15磅壓力保持20～30分鐘。壓力表的指針上升時(shí)，鍋內溫度也逐漸升高，當壓力表指針升至0.1MPa時(shí)或15磅時(shí)，鍋內溫度相當于120℃～121℃（等于一個(gè)大氣壓），此時(shí)開(kāi)始計算滅菌時(shí)間，控制熱源，使處于0.1MPa或15磅壓力保持20～30分鐘，即能達到完全滅菌的目的，然后停止加溫。當達到所需溫度時(shí)開(kāi)始計時(shí)，并在此溫度下保持所需的時(shí)間。
　　5、降溫：自然降溫或打開(kāi)活門(mén)排汽降溫。稍微打開(kāi)一點(diǎn)排氣活門(mén)，使鍋內蒸汽緩慢排除，然后逐漸開(kāi)大活門(mén)，氣壓徐徐下降，注意勿使排氣過(guò)快，否則會(huì )使鍋內的培養基沸騰而沖脫或沾染棉花塞，但排氣太慢又使培養基在鍋內，受高溫處理時(shí)間過(guò)長(cháng)，對培養基也是不利的。一般從排氣到打開(kāi)鍋蓋以10分鐘左右為好。
　　6、當鍋內蒸汽完全排盡時(shí)即壓力表指針降到零時(shí)，要立即打開(kāi)鍋蓋。
　　7、取出滅菌物品：當鍋內溫度下降到60℃左右時(shí)器材或培養基。如培養基需制備固體斜面培養基時(shí)，則應趁熱將試管斜放在桌上，上面蓋上報紙以免落灰塵，冷卻后便可收起。
　　8、較后將高壓滅菌器內的剩余水排出。
　　9、觀(guān)察滅菌效果。把滅菌培養基放入25℃溫箱中，培養48小時(shí)觀(guān)察滅菌效果。48小時(shí)后不見(jiàn)雜菌生出，便證明培養基已達到滅菌目的，可以使用。
　　五、思考題
　　1、干熱滅菌和高壓蒸汽法適用范圍如何?
　　2、電熱烘箱和高壓鍋如何操作?各有哪些使用注意事項?